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显微镜下的试管婴儿,是怎样“长大的”?
标签: 发布日期:2016年12月23日 浏览:1644次
很多想要做试管婴儿的患者,其实对整个实验室操作部分不了解,今天小编就给大家普及一下,试管婴儿实验室的操作过程。
我们将取卵的那天成为D0天,依次为D1-D6天。取卵时间是根据打HCG(称为扳机)时间来定的,一般在HCG后36-38小时取卵。临床扳机的同时会每一个扳机病人递一张取卵单到实验室,告知实验室工作人员扳机病人的基本情况,包括:夫妻双方姓名、年龄、卵泡数、新鲜或冷冻移植,以及一些特殊情况如剖宫产史、是否有传染病等。
取卵的前一天实验室工作人员会根据临床递单的情况配制取卵当天所用试剂,包括:冲针液,卵子体外操作液,受精液,胚胎培养液等。多数试剂(如胚胎培养液和受精液)必须放入二氧化碳培养箱平衡6小时以上才能使用,所以取卵人数必须提前至少一天通知实验室!
取卵当天(D0)早上八点半左右开始取卵,实验室人员会把每个病人的卵子颗粒细胞复合体(OCC)从卵泡液中捡出放入操作液中洗涤,除去粘附的红细胞及血块,然后转入受精液中培养2-4小时。取卵的同时男方病人手淫或穿刺取精子(供精患者由实验室人员根据夫妻双方血型去精子库挑选合适的精子),实验室人员对男方精液做常规分析,根据精液情况再结合既往周期受精情况决定授精方式。
授精方式有两种,IVF和ICSI。IVF主要针对精液常规正常,既往周期受精情况良好的病人;ICSI主要针对重度少弱精患者、精液常规正常但既往周期IVF受精不理想等情况的患者。如果取出精液不理想,一般情况下实验室人员会提醒男方取精一个小时后再次取精,将两次合并洗涤最终决定受精方式。
IVF受精一般在D0天上午11:40-12:00进行,将洗涤好的精液安一定的受精浓度加入受精液中和OCC一起培养到当天下午四点。ICSI受精一般在D0天下午进行。实验室人员14:00将OCC放入透明质酸酶中消化取出包裹在卵子外面的颗粒细胞,然后将卵子和精子放入ICSI皿中的不同液滴中,用显微操作针挑选形态良好的活精子,按每个卵子一条精子的方式依次注入。
IVF受精的卵子,在D0天下午四点由实验室人员用合适的剥卵针将卵子外周的颗粒细胞及粘附的精子剥除,将卵子放入胚胎培养液观察受精情况。看到第二极体为受精(2PB),受精卵子数小于成熟卵子的50%时,隔半个小时再次观察。直到17:30如果受精卵子数仍没达到成熟卵子的50%,将剩余未受精的成熟卵子行补救ICSI(RICSI)。
D1早上八点开始观察前一天取卵的受精情况,正常受精卵子中心有两个原核称为2PN。根据原核数成为NPN(N为原核数),无原核为0PN。大于2PN的受精卵发育成为的胚胎不可利用需丢弃。IVF受精的1PN和0PN胚胎在没有其它可胚胎可选择的情况下,可用利用但要告知病人风险。
D3早上八点开始观察卵裂胚情况。D3胚胎一般为6-8细胞,有些胚胎发育缓慢为2-5细胞,有些过快可以发育到融合胚。根据D3谈话单决定是否冷冻、养囊胚或移植。同意囊胚培养的病人,实验室人员会将胚胎换入新的培养皿中继续培养至D5。
D5早八点观察囊胚情况,如果有4-6期囊胚,根据D5谈话单决定是否移植或冷冻。如果是融合胚、早期囊胚或3期囊胚则需要继续培养至D6,根据D6的情况再决定是否冷冻或移植。
第三代试管婴儿技术,还可以在胚胎移植前,对胚胎的染色体基因进行筛选,以筛除有遗传病基因或染色体异常的胚胎,植入健康的胚胎;同时,在这个过程中,也可以知道胚胎的性别,不过目前国内能做第三的医院不多,而且除非有染色体疾病,不然是不允许的做的。世界范围内,只有美国和泰国是普遍应用第三代试管技术的。
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